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生物实验:血红蛋白的提取和分离

血红蛋白是高等生物体内负责运载氧的一种蛋白质(缩写为Hb或HGB)。是使血液呈红色的蛋白。血红蛋白由四条链组成,两条α链和两条β链,每一条链有一个包含一个铁原子的环状血红素。氧气结合在铁原子上,被血液运输。血红蛋白的特性是:在氧含量高的地方,容易与氧结合;在氧含量低的地方,又容易与氧分离。血红蛋白的这一特性,使红细胞具有运输氧的功能。下面是奥冠教育小编整理的生物实验之血红蛋白的提取和分离的知识。

蛋白质的提取和分离一般分为四步:

(1)样品处理:包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液。

(2)粗分离:透析除去分子较小的杂质。

(3)纯化:通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。

(4)纯度鉴定:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。

生物实验:血红蛋白的提取和分离  物理化学辅导  第1张

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(一)样品处理

1、红细胞的洗涤:

目的是去除杂蛋白。要加入柠檬酸钠防止血液凝固;离心将血液分层,用胶头吸管吸出黄色血浆;用生理盐水洗涤。

2、血红蛋白的释放:

在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放

3、分离血红蛋白溶液:

离心分层;滤纸过滤去除脂溶性沉淀层;分液漏斗分出红色透明液体。

4、透析:

装入透析袋并置于磷酸缓冲液中(PH为7.0)透析。

以上是奥冠教育小编整理的生物实验之血红蛋白的提取和分离,供大家参考和学习,希望对大家的学习有所帮助。

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